在輔助生殖的體外受精領域，卵胞漿內(nèi)單精子注射（ICSI）曾經(jīng)是體外受精（IVF）失敗的補救手段，但經(jīng)過多年發(fā)展ICSI在不孕不育治療領域中已占具舉足輕重的地位。ICSI技術(shù)的出現(xiàn)，為很多不孕不育家庭帶來了新的生育希望。

ICSI是一種高度技術(shù)化的體外受精技術(shù)。其工作原理是在顯微鏡下，通過精細的操作，將單個精子直接注射入卵子的胞漿中，實現(xiàn)受精。（如圖2）ICSI整個操作流程包括托顆粒細胞、精子制動、顯微注射以及胚胎培養(yǎng)四個步驟。（如圖3）在ICSI技術(shù)中，卵子必須從其周圍的卵丘細胞/顆粒細胞中分離以便觀察卵子的成熟和質(zhì)量。顆粒細胞主要分散在粘稠的透明質(zhì)酸中，而含透明質(zhì)酸酶的顆粒細胞去除液可將透明質(zhì)酸(即保持卵丘細胞的細胞外基質(zhì)的粘多糖)的己糖胺鍵水解，從而實現(xiàn)顆粒細胞從卵母細胞上分離，得到可用于卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射的卵母細胞，以便實施單精子注射技術(shù)。[2]

圖2 ICSI卵胞漿內(nèi)單精子顯微注射技術(shù)（圖片來源于網(wǎng)絡，侵刪）

圖3 ICSI操作流程

在ICSI技術(shù)中，卵母細胞退化是常見的現(xiàn)象，退化可能會在注射針撤出后立即發(fā)生，表現(xiàn)為卵母細胞的突然破裂和胞質(zhì)的泄漏。目前一些干預措施已經(jīng)被提出來減少卵母細胞退化。如使用更小的內(nèi)徑和更長的錐度的注射移液管可以顯著降低ICSI后的退變發(fā)生率；降低透明質(zhì)酸酶的濃度和暴露時間的長度也能降低其對卵母細胞可能產(chǎn)生的毒性作用。

除此之外，有研究表明使用重組人透明質(zhì)酸酶去除卵冠-卵母細胞復合物時更加安全有效，并能顯著提高受精率，降低卵母細胞損傷。[3]從數(shù)據(jù)中我們可以發(fā)現(xiàn)，使用重組人透明質(zhì)酸酶能夠?qū)⒛讣毎麚p傷率降低至3.08%，同時將受精率提高至73.44%。（如圖4）[3]

 圖4 使用牛源透明質(zhì)酸酶(2005a)或重組人透明質(zhì)酸酶(2006b)的卵母細胞損傷率和正常受精率

傳統(tǒng)動物來源的透明質(zhì)酸酶制劑，缺乏純度(<10%)，因此在臨床應用中引起了許多風險，主要包括動物源性病原體或污染物的傳播風險、批次間一致性以及對卵母細胞質(zhì)量的影響。而重組人透明質(zhì)酸酶是一種更安全、更有效的制劑，沒有病毒和其他病原體傳播的風險，而且具有一致的活性。[3]<>

中國政府對輔助生殖技術(shù)的支持在逐漸增強，相關政策也在不斷完善和細化。2020年3月27日，國家藥監(jiān)局發(fā)布的第一批醫(yī)療器械產(chǎn)品分類界定結(jié)果匯總中將顆粒細胞去除液作為三類醫(yī)療器械監(jiān)管，并對顆粒細胞去除液的成分與用途進行了明確的定義與描述。（如圖4）[4]預計在未來幾年，隨著科技的進步和生殖醫(yī)學領域的發(fā)展，輔助生殖技術(shù)的應用范圍可能會進一步擴大，體外受精-胚胎移植技術(shù)也能更加完善和普及，造福更多有需要的人們。

圖4 2020年第一批醫(yī)療器械產(chǎn)品分類界定結(jié)果匯總